sh-sy5y人神经母细胞瘤细胞（通过str）1）来源：详细资料请咨询上海文韧生物2）含量：1x106 个/mL3）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装气相：空气，95%；CO2，5%
产品时间：2020-03-24
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厂商性质：经销商
sh-sy5y人神经母细胞瘤细胞（通过str）
细胞名称 | sh-sy5y人神经母细胞瘤细胞（通过str） |
种属 | 人 |
细胞来源 | ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
传代 | 1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养ye去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换ye以及传代，一般2天换一次ye； 2.待细胞长满瓶底面积80%，需要对其进行传代，传代比例为1:2到1:3； 3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化ye置于室温预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于室温孵育消化（*次消化需置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为*消化时间，记录*消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml*培养基终止消化。用移ye枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后收集细胞悬ye，1000rpm离心3min，弃上清，加入*培养基重悬细胞，进行传代。（具体根据随货说明书进行操作） |
保存 | 冻存条件：*培养基+FBS+DMSO (备注：建议使用本公司的培养条件，用4度保存的冷冻ye直接重悬细胞，不能预热后使用。) 保存条件：yedan存储 |
供应限制 | 仅供研究之用 |
常见问题及解决方案 | 1.培养瓶有破裂，培养ye有漏ye：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间长不宜超过 72 小时） 3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养ye培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养ye继续培养，中间注意观察， |
体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2 或l:3 以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养。
细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增3～6 次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数／100 个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2％～0.5％，肿瘤细胞可达3～5％。
细胞接种2～3 天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。
1. 将长成单层的原代培养细胞或HeLa 细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置5～10 分钟。
2. 在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入3～5 ml 新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。
3. 将细胞悬液吸出2 ml 左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3 ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。
一般情况，传代后的细胞在2 小时左右就能附着在培养瓶壁上，2～4 天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
1.传代培养时要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染。所有操作要尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每一种细胞使用一套器材。培养用液应严格分开。
2.每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代。
3.如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BSS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗菌素，并经常更换培养基等。
传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细的无菌操作。
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