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细胞培养中支原体污染对细胞培养的危害

  • 发布日期:2020-07-03      浏览次数:90
    • 支原体污染对细胞培养的危害

      1.   支原体污染的普遍性

      支原体污染是细胞培养领域遇到的全球性问题,据文献报道,综合美国食品药品监督管理局(FDA)、美国模式菌种收集中心(ATCC)等机构收到的相关数据,世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。该数据未统计中国大陆的数据,但可以确定,大陆地区的支原体污染比例与此相当,或更严重。

      2.   支原体污染的危害

      根据已发表的支原体污染研究文献,支原体污染细胞后,几乎能影响每一个细胞参数。

      1)   支原体污染可能导致细胞染色体的异常和损伤,改变细胞的代谢、生长、形状、附着。

      2)   支原体影响被污染细胞的基因表达。相关研究表明,支原体污染的细胞系与对照组比较,有多达200个基因表达差异达2倍以上。

      3)  导致MTT等细胞毒性实验结果严重错误。支原体对MTT有额外还原作用。

      4)  支原体污染能耗尽营养物,促进代谢积累,重度支原体污染导致pH改变。

      5)   诱导或抑制细胞因子表达,并改变培养细胞的代谢、增殖特征及形态。支原体污染可以直接影响L-arginine的代谢

      6)   支原体污染可以诱导树突状细胞成熟,这对于开展人体免疫细胞的肿瘤治疗的影响将是灾难性的。

      3.     支原体污染的隐蔽性

      支原体大小约0.1 - 0.6微米,体积比病毒稍大,轻度到中度的支原体污染不会明显改变细胞培养液的浑浊度和pH值,也不会导致细胞形态或生长速度的明显改变,所以科研人员很难及时发现体外培养的细胞已经被支原体污染,进而改变了基因表达谱,显示虚假的实验数据和实验结果。通常情况下,如果不排除支原体污染因素,很多实验结果往往缺乏说服力。2013年,国际Ding级期刊《Nature》明确要求,在涉及细胞培养的科研工作中,必须进行支原体检测,并排除其影响。

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