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胎牛血清的制备
一、目的：
为了保障胎牛血清产品质量的均一性和稳定性，制定以下操作方
法，以规范胎牛血清生产制备。
二、操作方法：
(一）采血
1、挑选出大约8月龄以上的健康妊娠母牛，经剖腹获取小牛。
2、将小牛清洗干净后，侧放在万级洁净房间内的采血台上，固
定四肢及头部。
3、用来苏水清洗心脏外部，刮去心脏外部牛毛，露出心脏外部
一侧皮肤，用2%碘酒擦拭消毒。
4、在心脏部位切开一道10厘米左右的切口，取出近心血管，先
用2%碘酒消毒，再用75%的酒精消毒，雨止血钳夹住血管，切开1厘
米左右的切口进行插管，插好管后打开血管的止血钳，让牛血顺采血
管流入另一个洁净房间内的采血瓶中。
5、采血瓶采血前经干烤灭菌（180℃2小时）后，按无菌操作
注入10毫升左右经高压灭菌的生理盐水后加塞封口，于采血前半小
时放入 37℃恒温箱备用。采血前先晃动瓶内生理盐水，使其充分湿
润瓶壁后倒出，再进行采血并加塞封口。将采血后的采血瓶放37℃恒
温室2小时，再放入4℃冷库4小时以备离心。
（二）离心
将准备好的采血瓶放入离心套筒调好平衡后，对称放入离心机，
按1800转/分钟离心50分钟后，放入4℃冷库备用。
（三）抽血清
取出4℃冷库离心好的采血瓶，注意轻抬轻放，以免将下层血kuai
和血清混层。将经过高压灭菌装有两孔瓶塞的 5000ml 大瓶的抽气孔
一端的管子接好空气滤器，再接到压缩机抽气口上。打开压缩机，用
抽血清孔的管子轻轻抽取采血瓶内的上清液，注意控制好抽管，避免
抽到下层血kuai。将抽好的血清分装，即为粗制胎牛血清，放入-20℃
冷库冷藏备用。
（四）血清过滤
1、将-20℃冷库内的粗制血清取出化冻。
2、将化冻后的粗制血清用经过高压灭菌的12层医用脱脂棉纱布
进行初滤。
3、把初滤后的血清倒入大罐进行混合。
4、将装好滤芯的滤器做密封性试验和发泡试验合格后，经过高
灭菌，在洁净室内用无菌操作法将滤器按滤柱孔径由大到小的顺序
行组装，并装上压力表。把滤器大孔径一端和蠕动泵出口进行连接。
5、用蠕动泵将大罐内的血清送入滤器进行过滤。
6、将滤出的血清在百级净化操作台上进行分装后，即为精制胎
牛血清，送-20℃冷库储存。
三、注意事项：
1、在操作过程中，要经常用75%的酒精对手部进行消毒，同时避免
接触牛血或血清，特别是有伤口的部位，以免感染。
2、在采血插管过程中，插管避免接触到未消毒的部位，尽量深入血
管，使牛血能快速流完为好，并固定好插管，避免脱离动脉血管。
3、在抽血清的过程中，控制好压缩机的压力大小，避免压力过大，
抽到下层的沉淀物。
4、在过滤过程中，控制好压力的大小，避免超过滤柱工作压力。
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