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BV173人外周血B细胞系

简要描述:

BV173人外周血B细胞系
细胞名称: BV173(人外周血B细胞)
背景资料: 见细胞说明书
细胞来源: 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系

产品时间:2020-06-22

访问量:37

厂商性质:经销商

BV173人外周血B细胞系    

"选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。
瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀小心勿造成气泡,使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃ 解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,BV173人外周血B细胞系一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清包括不同批次对细胞的影响。细胞缩写:"    BV173细胞
细胞名称:    BV173(人外周血B细胞)
背景资料:    见细胞说明书
细胞来源:    细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
规格:    复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)
"细胞冻存及复苏基本知识普及:
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。
除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜DMSO,可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。 
采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内-196℃。细胞数:"    1*10(6)
生物安全级别:    1
生物体:    人
组织来源:    肝
细胞形态:    B细胞前体白血病
细胞特性:    悬浮
细胞活力:    95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:    细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
"细胞常规培养传代流程请严格遵照无菌操作
1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞注意把握消化时间,通常控制在1-2min
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时不建议消化到细胞漂浮去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4、注意培养基PH值变化情况,定期换液每周2-3次,待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
特别注意:如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养
1、收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,原瓶培养基的继续使用时间长不宜超过72小时
2、贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养
3、如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。培养条件:"    详见细胞说明书
传代方法:    建议1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:    详见细胞说明书
主要文献:    请具体查阅相关发表文章
细胞接收操作说明:请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。
本公司细胞发货有四种形式:T25培养瓶(一般是贴壁细胞使用,悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多,当然,有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞,但是,长期经验来说,贴壁细胞容易发生形态变化,BV173人外周血B细胞估计是细胞培养空间狭小,血清不足导致(主要是怕运输延误导致这些情况发生),个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用,主要是冬天天气冷,温度低于4℃的地方,都要考虑冻存细胞)。
T25培养瓶:是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用,如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。
离心管:是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75 培养瓶,加入10-15ml培养基,,建议10ml培养基,也可以使用T175 培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,先不要用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。
干冰:是用本公司冻存液冻存细胞后,直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
接收细胞相关问题:如不能在收到细胞后及时操作细胞,T25及离心管发货的细胞将可以消毒后在37度过夜,血清发货的细胞在室温下静置1-2天(注意不要放冰箱),干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,请即刻复苏细胞。
T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min)后,将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。
部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。

上海文韧生物相关细胞代号如下,欢迎咨询,下单:

名称中文名生长特性
G422小鼠脑神经胶质母细胞贴壁
GBC-SD人胆囊癌细胞系贴壁
GC-1 spg小鼠精原细胞系贴壁
GEC-1人胃黏膜上皮细胞贴壁
GH3大鼠垂体瘤细胞悬浮生长,多细胞聚集
GL261小鼠胶质瘤细胞贴壁
Granta-519人类B细胞株淋巴癌细胞悬浮
H0-8910PM高转移人卵巢癌细胞贴壁
H1299人大细胞肺癌细胞贴壁
H1666人肺支气管癌细胞贴壁
H22小鼠肝癌细胞半悬浮
h22小鼠腹水肝癌细胞悬浮
H4人脑神经胶质瘤细胞贴壁
H4人神经胶质瘤细胞贴壁
H446人小细胞肺癌细胞 贴壁
H9人T淋巴瘤细胞悬浮
H9C2大鼠心肌细胞  贴壁
HA人星形胶质细胞贴壁
HAC人血管平滑肌脂肪瘤细胞贴壁
HaCaT人永生化表皮细胞贴壁
HASMC人主动脉平滑肌细胞贴壁
HBMEC人脑微血管内皮细胞贴壁
HCAECS人冠状动脉内皮细胞贴壁
HCC1187人乳腺导管癌细胞贴壁
HCC15人肺癌细胞贴壁
HCC1954人乳腺导管癌细胞贴壁
HCC2157人乳腺导管癌细胞贴壁
HCC-78人肺腺癌细胞贴壁
HCC827人非小细胞肺癌细胞贴壁
HCCCT-1人胆管癌细胞贴壁
HCCLM3人高转移肝癌细胞贴壁
HCE1人宫颈癌细胞贴壁
HCEC 人角膜上皮细胞贴壁
HC-OA成人软骨细胞-骨性关节炎  贴壁
HCS-2/8人软骨肉瘤细胞系贴壁
HCT116人结肠癌细胞贴壁
HCT116人结肠癌细胞贴壁
HCT-15人结肠癌细胞贴壁
HCT-8人回盲肠癌细胞贴壁
HCT-8/5-FU人结肠腺癌细胞5-FU耐药株贴壁
HCT-8/taxol 人结肠癌紫杉醇耐药株贴壁
HCT-8/VCR人结肠腺癌细胞长春新碱耐药株贴壁
HEB人脑胶质细胞贴壁
HEC-1A人子宫内膜癌贴壁
Hec-1-b 人子宫内膜腺癌细胞贴壁
HEK293人肾上皮细胞  贴壁
HEK-293T转染过的人肾细胞贴壁
Hela人子宫颈癌细胞贴壁
HELA/ADR人子宫颈癌细胞阿霉素耐药株贴壁

 

 

 上海文韧生物科技有限公司

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