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GIST882人胃肠道间质瘤细胞含(str)

简要描述:

GIST882人胃肠道间质瘤细胞含(str)
1)来源:详细资料请咨询上海文韧生物
2)含量:1x106 个/mL
3)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
气相:空气,95%;CO2,5%

产品时间:2020-04-13

访问量:41

厂商性质:经销商

GIST882人胃肠道间质瘤细胞含(str)

细胞名称

GIST882人胃肠道间质瘤细胞含(str)

种属

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

传代

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养ye去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换ye以及传代,一般2天换一次ye;

2.待细胞长满瓶底面积80%,需要对其进行传代,传代比例为1:2到1:3;

3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化ye置于室温预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于室温孵育消化(首次次消化需置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间,记录zui佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移ye枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬ye,1000rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。(具体根据随货说明书进行操作)

保存

冻存条件:完全培养基+FBS+DMSO

(备注:建议使用本公司的培养条件,用4度保存的冷冻ye直接重悬细胞,不能预热后使用。)

保存条件:yedan存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂,培养ye有漏ye:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。

2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时)

3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养ye培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养ye继续培养,中间注意观察,

 

细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术,它在细胞学、遗传学、病毒学、免疫学的研究和应用中发挥重要作用。细胞培养也是研究病毒与研制疫苗的基础技术,因此细胞培养技术在遗传学、免疫学、肿瘤学、病毒学、分子生物学等领域已得到广泛的应用。近年来发展起来的核移植、细胞杂交、DNA介导的基因转移以及一些物理图谱的建立, 也都需要与细胞培养紧密结合。

实验室设计:

实验室的设计要求:无菌室空间大小应适度,环境要求清洁、干燥、无烟尘,屋顶装有紫外灯,天花板不宜高过2.5 m,以保证紫外线的有效杀菌作用,同时安装空气过滤调节装置,便于臭氧的排出。还应设置面积不小于6 m2的缓冲间及与工作分开的更衣柜。如果细胞

培养室面积大于一个标准单元,至少应有两个出口,以随时保持畅通。细胞室里的试验台和仪器布局应合理,一般来说,二氧化碳培养箱和净化工作台不应对着门摆放,离心机不应离得太远。实验台面的材料应具有耐磨、耐腐蚀、耐火、防水、绝缘等性能。

试剂与耗材:

培养液:迄今为止,人工合成的培养基已有多种,如RPMI-1640、Eagle’s MEM、DMEM、Ham’s F12等,其主要差别在于氨基酸、维生素、无机盐和能源物质的组成及含量不同。一般认为,RPMI-1640营养全面,对各种组织生长都适用;Eagle’sMEM适合于细胞株的传代培养;DMEM有利于细胞的分裂增殖;Ham’s F12 能促进细胞的分化。

血清:淋巴细胞对血清的要求较高,所以选用血清时要注意生产厂家。胎牛血清效果好,但价格昂贵,新生小牛血清或小牛血清也价格不菲,而使用自身血清不仅细胞长得好,而且更接近体内环境,避免了外来因素的干扰,使实验设计更严密。培养基中血清的浓度在5%~15%时细胞生长比较好,保证血清的质量是细胞培养的关键,质量好的血清应该是无溶血、橘黄色清亮透明、无细菌、无支原体污染的粘稠状液体,在用于临床的淋巴细胞或干细胞培养中,严禁使用异体血清。

耗材:细胞培养常用耗材包括移液管,离心管,培养皿,孔板,培养瓶等,传统细胞培养实验室使用可重复玻璃耗材,先用清水洗净后,用2%稀HCl浸泡过夜,流水冲洗后再蒸馏水冲洗,烤干后高压灭菌。爱康得为保证细胞培养质量,全部使用Corning、Thermo等一次性无菌无热原产品。

人员管理:

每个进入细胞室的工作人员应保证其个人卫生。进入缓冲间时,应更换洁净的工作服和拖鞋,进入培养室时须戴帽子,手套,口罩和净化服。di一个进入培养室的人员及时开启空气净化装置,最后离开人员关闭空气净化装置。每天实验前必须紫外线常规消毒1 h(包括洁净台)。每周1次卫生消毒工作,包括地面、培养箱、桌面等其他部位。每月一次全面清洁工作,包括地面、桌面、培养箱、洁净工作台等。每周一次空气细菌培养检查(包括地面、洁净台、培养箱、工作人员手指

 上海文韧生物科技有限公司

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