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tpc-1人乳头瘤状甲状腺癌细胞(通过str)

简要描述:

tpc-1人乳头瘤状甲状腺癌细胞(通过str)
1)来源:详细资料请咨询上海文韧生物
2)含量:1x106 个/mL
3)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
气相:空气,95%;CO2,5%

产品时间:2020-03-16

访问量:189

厂商性质:经销商

tpc-1人乳头瘤状甲状腺癌细胞(通过str)

细胞名

 tpc-1人乳头瘤状甲状腺癌细胞(通过str)

种属

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

传代

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2天换一次液

2.待细胞长满瓶底面积80%,需要对其进行传代,传代比例为1:2到1:3

3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于室温预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于室温孵育消化(首次次消化需置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间,记录zui佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1000rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。(具体根据随货说明书进行操作)

保存

冻存条件:完全培养基+FBS+DMSO

(备注:建议使用本公司的培养条件,用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。)

保存条件:液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。

2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时)

3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,

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欢迎大家来到---细胞培养知识小知识课堂

今天我们要讲的是细胞培养“主角”---血清

血清是一种纯天然培养基,含有细胞生长繁殖所需的多种营养成分,如蛋白质、多肽等,多用于细胞培养、生物制品及诊断试剂的生产。

血清的主要成分是蛋白质,如:白蛋白,球蛋白,纤维粘连素(促进细胞附着)、α2巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用),激素,胰岛素(可促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,促细胞分裂),类胰岛素生长因子(能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而产生与胰岛素相同的作用),促生长激素(细胞增殖),胎球蛋白(促细胞附着),转铁蛋白(能结合铁离子,减少其毒性)。血清的组成成分与含量常常与供血动物性别、年龄、生理条件和营养条件有关。

那么如何挑选合适的血清?使用血清时,需要注意哪些问题?请大家跟随我们进入文韧生物知识小课堂进行学习起来吧 !   Lets go!

胎牛血清和新生牛血清的区别是什么?

取血年龄不同:牛血清按照牛取血时间或牛龄可进行区分。胎牛血清(Foetal Bovine Serum,简称FBS)指的是取自未出生,母牛剖腹得来的胎牛。

国产胎牛血清(并无明确定义,但通常以此称)的指的是出生4-6小时,且未进行哺乳(unsuckled)进食的牛,有时还称作国产新生牛。

新生牛血清(Newborn Calf Serum,简称NBCS)指的是出生14天-3个月进行取血的牛。

成年牛血清(Adult Bovine Serum,简称ABS)指的是取血时牛龄通常超过12个月的牛。

以上取血牛龄的差异主要是受当地国家畜牧业的发展及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专门为取血而养的牛。

组分与比例不同:这几种不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说,年龄越小的牛血清,细胞培养效果越好。胎牛血清培养效果好于新生牛,且因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低。

用途与用法不同:根据细胞所需生长条件可确定。

如何挑选适合细胞生长的血清?

原代或是正常细胞株建议使用特级胎牛血清或者优等胎牛清,对生长条件要求高的细胞和干细胞可选用专用特级胎牛血清,或胚胎干细胞专用胎牛血清。

由于血清有批间差异,细胞种类不同,我们建议客户购买前可先申请试用样品,通过筛选得到满意的血清批号,之后根据项目需求可进行批量囤货,以保证该项目所需血清zhi量的一致性,可排除不同批号血清对于实验带来的影响。

如何正确保存血清?

需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱(未开封血清有效期为5年)。若存放于4℃,请勿超过1个月,若一次无法用完一瓶,建议将血清无菌分装并冷冻。

如何解冻血清?

血清解冻需采用逐步解冻法:将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天,然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),减少沉淀生成。切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻,这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀。

需要对新买的血清进行过滤吗?

血清在ISO13485认证的厂房中生产,经过3次0.1μm过滤,出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测,污染几率非常低。通常细胞污染有非常多的可能性,根据协助使用者进行分析检测,结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染。因此买来的血清不需要再次进行过滤。 

除了对血清进行检测,有何更直观的方式分辨血清质量?

目测法,我们可根据血清的颜色,沉淀,澄清度等进行区分。

颜色:颜色根据血清蛋白含量的不同,可表现出黄色或者红色。进口血清质量的呈现出淡黄、微红色,较差质量呈现出橘红色或鲜红色。热灭活血清或保存不当的,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红色,甚至咖啡色。

沉淀:血清中的沉淀主要是有纤维蛋白的凝聚产生。沉淀产生的原因很多,使用时反复冻融会增加沉淀。进口血清过滤分装前很少反复冻融,因此成品清澈。

澄清度:进口血清是由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡。国产血清绝大多数为新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深。

为何血清会存在批间差?如何避免此影响?

因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。

为了避免批间差异对细胞的影响,XP建议先进行批号测试,筛选合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃下可保存5年)。如需更换血清批次或产地,建议先试用后再大量订购。

 

 

 

 

 

 

1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。

4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

5.客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以咨询技术电话,我们随时给予解答。

上海文韧生物科技有限公司

 

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