产品展示
PRODUCT DISPLAY
产品展示您现在的位置: 首页 > 产品展示 > 细胞株细胞系 > 人源细胞株 >U937人组织细胞淋巴瘤细胞(通过str)

U937人组织细胞淋巴瘤细胞(通过str)

简要描述:

U937人组织细胞淋巴瘤细胞(通过str)
1)来源:详细资料请咨询上海文韧生物
2)含量:1x106 个/mL
3)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
气相:空气,95%;CO2,5%

产品时间:2020-03-16

访问量:114

厂商性质:经销商

U937人组织细胞淋巴瘤细胞(通过str)

细胞名称

 U937人组织细胞淋巴瘤细胞(通过str)

种属

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

传代

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2天换一次液

2.待细胞长满瓶底面积80%,需要对其进行传代,传代比例为1:2到1:3

3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于室温预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于室温孵育消化(首次次消化需置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间,记录zui佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1000rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。(具体根据随货说明书进行操作)

保存

冻存条件:完全培养基+FBS+DMSO

(备注:建议使用本公司的培养条件,用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。)

保存条件:液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。

2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时)

3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,

 相关产品

 

B-CPAP

人甲状腺癌细胞

NCI-H1975

人非小细胞肺腺癌细胞

HK-2

人肾皮质近曲小管上皮细胞

J82

人膀胱癌细胞

A431

人皮肤鳞癌细胞

MG63

人骨肉瘤细胞

SW48

人结肠癌细胞

ME180

人宫颈表皮样癌

hepaRG-GFP

Gfp标记的人肝癌细胞

BEAS-2B

人正常肺上皮细胞

THP-1  ATCC:TIB-202

人髓系白血病单核细胞

PC9

人肺癌细胞

Fadu

人咽鳞癌细胞

Huh7

人肝癌细胞

HCCC9810

人肝癌细胞

Jurkat cloneE6-1

人急性T淋巴细胞白血病细胞

KBM-7

人慢性粒细胞白血病细胞

GBC-SD

人胆囊癌细胞

JEKO-1

人套细胞淋巴癌细胞

CAL27

人口腔鳞癌

DB

弥漫大B细胞淋巴瘤细胞

hne1-lmp1

转入LMP1基因人鼻咽癌细胞

nci-h226

人肺鳞癌细胞

hepg2.2.15

人肝癌细胞

SK-BR-3

人乳腺腺癌细胞

SNU-1

人胃癌细胞

su-dhl-6

人B细胞淋巴瘤细胞

HL-60

人早幼粒急性白血病细胞株

nk-92mi

人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞

kg-1

人急性骨髓性白血病细胞

nci-h209

人小细胞肺癌细胞

sk-hep-1

人肝癌细胞

sw579

人甲状腺鳞癌细胞

nthy-ori-3-1

人甲状腺正常细胞

bt474

人乳腺导管癌细胞

ncm460

人正常结肠上皮细胞

hmec-1

人微血管内皮细胞

mrc5

人胚肺细胞株

t2

人T2细胞

22rv1

人前列腺癌细胞

hct8

人结直肠腺癌细胞

786-o

人肾透明细胞腺癌细胞

SKOV3-GFP

转染GFP的人卵巢癌细胞

RKO

人结肠癌细胞

calu-1

人肺癌细胞

kb

人口腔表皮样癌细胞

ovcar3

人卵巢腺癌细胞

u937-dc-sign

人组织细胞淋巴瘤细胞

a375

人恶性黑色素瘤瘤株

u2OS

人成骨肉瘤细胞

h69ar

人小细胞肺癌细胞

sk-mel-28

人皮肤恶性黑色素瘤

95D

人高转移肺癌细胞

nci-h226

人肺鳞癌细胞

calu3

人肺腺癌细胞

C666-1

人鼻咽癌细胞

HT1080

人纤维肉瘤细胞

ASPC-1

人胰腺癌细胞

TT

人髓样甲状腺肿瘤细胞

NOZ

人胆囊癌细胞

HCCLM3

人高转移肝癌细胞

mda-mb-453

人乳腺癌细胞

TFK-1

人胆管癌细胞

FHs 74 Int

人小肠上皮细胞

H9胚胎干细胞

人胚胎干细胞

caki-2

人肾透明细胞癌细胞

mda-mb-231

人乳腺癌细胞

pc3

人前列腺细胞

sh-sy5y

人神经母细胞瘤细胞

hec-1-a

人子宫内膜腺癌细胞

HO-8910

人卵巢癌细胞

SMMC7721

人肝癌细胞

RL95-2

人子宫内膜癌细胞

H520

人小肺癌细胞

peo(peo1)

人卵巢癌细胞

sw620

人结肠癌细胞

6-10b

人鼻咽癌细胞

mhcc-97L

人肝癌细胞(低转移)

mhcc-97H

人肝癌细胞(高转移)

huh7.5

人肝癌细胞

jeg3

人绒毛膜癌细胞

hutu80

人十二指肠腺癌细胞

DAMI

 人巨核细胞白血病细胞

HEL

人红白细胞白血病细胞

hFOB 1.19

人SV40转染成骨细胞

NCI-H524

人非小细胞肺癌细胞

NCI-H1264(H157)

人肺鳞状细胞癌细胞

NCI-H358

人非小细胞肺癌细胞

PLC/PRF/5

人肝癌细胞

BHT101

人甲状腺癌细胞

T-47D

人乳腺管癌细胞

A172

人胶质母细胞瘤细胞

ACHN

人肾细胞腺癌细胞

ARPE-19

人视网膜色素上皮细胞

AV3

人宫颈癌细胞

BT-549

人乳腺导管癌细胞

CAOV-3

人卵巢腺癌细胞

CoC1

人卵巢癌细胞

HCC827

人非小细胞肺癌细胞

Hep 3B2.1-7 [Hep 3B, Hep-3B, Hep3B]

人肝癌细胞

HPAC

人胰腺癌细胞

HT-1376

人膀胱癌细胞

JAR

人胎盘绒毛癌细胞

KNS-89

人脑胶质细胞瘤细胞

LN229

人胶质瘤细胞

LNCaP clone FGC

人前列腺癌细胞

MDA-KB2

人乳腺细胞

MDA-MB-361

人乳腺癌细胞

MET-5A

人膜间皮细胞

MGC-803

人胃癌细胞

NCI-H1650 [H-1650, H1650](MKN-1)

人肺支气管癌细胞

RT4

人膀胱移行细胞乳头瘤

SK-N-MC

人神经上皮瘤细胞

SK-N-SH

人神经母细胞瘤细胞

SW 982 [SW-982, SW982](sjsa)

人滑膜肉瘤细胞

 

 

 

 

冻存和复苏的原则:慢冻快融

当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。

如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。

慢冻程序

1.  标准程序:采用细胞冻存器

当温度在-25 ℃以上时,  1~2 ℃/min;

当温度达-25 ℃以下时, 5~10 ℃/min;

当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。

2.  简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2 ℃的速度,在40 min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。

3.  传统程序:冷冻管置于4℃ 10 分钟→ -20℃ 30 分钟→ -80℃ 16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽长期储存。

细胞计数及存活测试

原理:

(1)计算细胞数目可用血球计数盘或是Coultercounter粒子计数器自动计数。

(2)血球计数盘一般有二个chambers,每个chamber中细刻9个1mm2大正方形,其中4个角落之正方形再细刻16个小格,深度均为0.1mm。当chamber上方盖上盖玻片后,每个大正方形之体积为1mm2×0.1mm=1.0x10 -4ml。使用时,计数每个大正方形内之细胞数目,乘以稀释倍数,再乘以104,即为每ml中之细胞数目。

(3)存活测试之步骤为dyeexclusion,利用染料会渗入死细胞中而呈色,而活细胞因细胞膜完整,染料无法渗入而不会呈色。一般使用蓝色之trypan blue染料,如果细胞不易吸收trypan blue,则用红色之Erythrosin bluish。计算细胞活率:活细胞数/(活细胞数+死细胞数)×100%。计数应在台盼兰染色后数分钟内完成,随时间延长,部分活细胞也开始摄取染料;因为台盼兰对蛋白质有很强的亲和力,用不含血清的稀释液,可以使染色计数更为准确。

材料:

0.4%w/v trypan blue;Erythosin bluish stain;取0.1gram Erythrosin bluish、0.05gram preservative methyl paraben溶于100mlCa++/Mg++freesaline;血球计数盘及盖玻片(Hemocytometerandcoverslip);计数器(counter);低倍倒立显微镜;粒子计数器(Coultercounter,CoulterElectronics)。白细胞稀释液(4%乙酸溶液)。

步骤:

(1)取50μl细胞悬浮液与50μl trypan blue(orErythrosinbluish)等体积混合均匀于1.5ml小离心管中。

(2)取少许混合液(约15μl)自血球计数盘chamber上方凹槽加入,盖上盖玻片,于100倍倒立显微镜下观察,活细胞不染色,死细胞则为蓝色(或红色-Erythrosin bluish)。

(3)计数四个大方格之细胞总数,再除4,乘以稀释倍数(至少乘以2,因与trypanblue等体积混合),最后乘以104,即为每ml中细胞悬浮液之细胞数。若细胞位于线上,只计上线与右线之细胞(或计下线与左线之细胞)。

注:

4大格细胞总数×稀释倍数×10 4/4=细胞数/ml

每一大格的体积

=2.5px×2.5px×0.25px=10 -4ml

计数板计数时,最适浓度为5~10×10 5细胞/ml,此范围外计数误差偏大。高浓度细胞悬液,可取出部分作稀释或连续稀释后计数。

注意要点:

1、冷冻越慢越好,复苏越快越好。

2、与液氮接触的操作,注意戴保护眼镜和手套。细胞复苏时,水浴中摇动小瓶易爆炸。且DMSO为有毒致癌品,接触时带好手套。

3、冻存细胞数量要足够,一般最低要达到5x10^6/ml。浓度视情况而定。

4、做好标记:培养瓶上应该用马克笔做好标记,写上细胞名称、代数和冻存时间。

5、对刚复苏的细胞动作要轻柔,避免细胞破裂。

6、DMSO对大多数细胞不敏感,所以解冻之后不需要除去DMSO,解冻后频繁换液会慢慢除去DMSO。部分对DMSO敏感的细胞需要除去DMSO。

7、解冻后的细胞要用和以前一样的培养液和血清,突然换不一样的培养液和血清会造成细胞生长不良,甚至死亡。

 

 

 

 

 

1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。

4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

5.客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以咨询技术电话,我们随时给予解答。

上海文韧生物科技有限公司

 

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
在线客服