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干细胞血清如何解冻才不会受损?

  • 发布日期:2020-04-15      浏览次数:204
    •    某些细胞必需干细胞血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可。血清一般储存于-20℃的温度条件,同时应避免反复冻融。若存放于4℃时,请勿超过一个月。
        干细胞血清中絮状沉淀的处理:
        沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白,这是正常特性,不会影响产品性质。离心血清(400g,1-2分钟)或简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤。
        血清使用浓度一般为5-20%,常用是10%。过多血清容易使培养中的细胞发生变化,特别是一些二倍体的无限细胞系,迅速生长之后容易发生恶性转化。
        如何解冻血清才不会使其产品质量受损?
        将干细胞血清从冷冻箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。
        解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
        请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
        混合型干细胞血清保存方法:
        血清应保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
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