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探讨澳洲胎牛血清的蛋白提取技术

  • 发布日期:2020-04-08      浏览次数:94
    •    澳洲胎牛血清取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少,所以胎牛血清是品质z高的。
        澳洲胎牛血清的储存条件:
        血清一般储存于-20℃,同时应避免反复冻融。购买大包装的血清后,首先要灭活处理,然后分装成小包装,储存于-20℃,使用前融化。融化时现置于4℃。融化后的血清在4℃不宜长时间存放,应尽快使用。
        澳洲胎牛血清的蛋白提取工艺:
        1.分离血浆、取新鲜牛血放入制冷功能离心机中,加入血量的10%的浓度为3.8%的枸橼酸钠、离心温度2°C以下,分离血浆、血球、收集血浆、血球另用。
        2.将血浆放入夹层反应罐内、夹层内加热水,边加热水边加入牛血清容积的0.2-0.3%的辛酸钠、缓慢搅拌、温度在55-65°C,溶解后调PH值、加入浓度为1摩尔的盐酸、将PH调至4.6.5然后加入血清总量的5.5%的浓度为95%的乙醇、过滤滤渣去掉。
        3.脱盐和浓缩、将滤液用20000分子量以下的超滤器洗脱盐类及其它小分子杂志同时进行浓缩。
        冻干、将浓缩液按冻干即将浓缩液迅速冷冻至-40°C、持续1小时左右,升到-25°C、持续10-20小时再缓慢升温到0°C再持续1-4小时升温保存温度20°C为成品。
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