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正确使用澳洲胎牛血清才能达到更好的效果

  • 发布日期:2021-01-29      浏览次数:186
    •    澳洲胎牛血清是细胞培养中重要的天然培养基。它是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养。
        因此,如何在使用过程中保护这些因子的活性,达到z大的细胞培养效果,就需要正确地使用胎牛血清。
        正确地使用澳洲胎牛血清可分为以下四个方面:
        1.正确储存,避免反复冻融
        1)血清在-20°C冻存。
        2)血清避免反复冻融,以免降低因子活性。如一次用不完,应进行分装。
        3)血清和培养基应尽可能“现用现配”,配好的培养液,应于一周内用完。
        4)血清避免在4°C或更高温度静置过久,否则会破坏血清中有效活性成分,影响血清品质。
        2. 正确的融化
        目前市面上比较流行的【血清融化三步法】可更大限度地保存血清中因子的活性,不会产生沉淀,同时能缩短血清融化时间。
        3. 关于胎牛血清的灭活
        真正的胎牛血清因为胎牛没有形成有效补体,如果针对补体灭活的话,就不需要。其他情况根据实验设计来决定。
        4.胎牛血清的浓度
        澳洲胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基础培养基中,混合后配成完全培养基。曾有文献报道,不同的血清浓度对细胞存在一定的影响,尤其是干细胞和原代细胞。具体合适浓度需要用户根据自己的实验来确定,以既保证培养的效果,又避免血清的浪费。
        值得一提的是,血清都是在认证的厂房中生产,经过3次0.1μm过滤,出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测,污染几率非常低。通常细胞污染有非常多的可能性,根据协助使用者进行分析检测,结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染。因此买来的血清不需要再次进行过滤。
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