对于大部分科研人员来说,研究中一般用到均是现成的细胞系/株,我们只需要:进行细胞传代和保种。然而,这些细胞系常常由于体外长期培养,而丢失原有生物学特性,对药物处理的反应差距越来越大。因此,原代细胞的地位日渐凸显,Paper中若有了原代细胞的数据都会添色不少。然而,就小编亲生经历,原代细胞分离着实是个技术活,今天我们就结合自身经验,为大家介绍:肿瘤组织和正常组织的原代细胞的分离与培养方法。
第YI部分:原代细胞的基本知识
1. 什么是原代细胞培养?
原代细胞(Primary cells):是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。这里的组织主要指:组织器官、外周血及胚胎等。
原代细胞培养:由于原代细胞生长缓慢,繁殖一定的代数停止生长(一般10代以内)。所以一般认为:培养的原代的第1和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
2. 原代细胞与细胞系(cell lines)的区别
原代细胞和细胞系的比较:
Primary cells | Cell lines | |
增殖能力 | 较弱 | 强 |
繁殖代数 | 一般只能传10代以内 | 无限增殖,50代左右 |
遗传物质完整性 | 遗传物质未改变 | 遗传物质发生改变 |
生物特性 | 接Jin临床样本 | 偏离临床样本 |
培养容易程度 | 比较复杂 | 简单,易操作 |
3. 原代细胞的应用
由于原代细胞生物学特性未发生很大改变,接Jin和反映体内生长特性,因此是:
(1) 研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的工具;
(2)更好实现精Zhun医疗的肿瘤诊治模式,实现个体化精Zhun用药的目的。