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SH30809.01培养基 .现货

  • 发布日期:2020-10-09      浏览次数:28
    • SH30809.01培养基 .现货优势订购

      1. 液体培养基贮存于4 oC 冰箱,避免光照,实验进行前放在37 oC 水槽中温热。

      2. 液体培养基(加血清) 存放期为六个月,期间glutamine 可能会分解,若细胞生长不佳,可以再添加适量glutamine。

      3. 粉末培养基配制(以1 升为例):
      细胞培养基通常须添加10 % 血清,因此粉末培养基之配制体积为900 ml,pH 为7.2 - 7.4。NaHCO3 为另外添加,若将NaHCO3 粉末直接加入液体培养基中会造成pH 之误差,或局部过碱。因此粉末培养基及NaHCO3 粉末应分别溶解后才混合,然后用CO2 气体调整pH,而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH),因为氯离子对细胞生长可能有影响,且贮存时培养基的pH 易发生改变。
      材料:
      1. 纯水(milli-Q 水或二次至三次蒸馏水,水品质非常重要)
      2. 粉末培养基
      3. NaHCO3 (Sigma S-4019)
      4. 电磁搅拌器
      5. 无菌血清瓶
      6. 0.1 或0.2 mm无菌过滤膜
      7. pH meter
      8. 真空帮浦
      9. CO2 气体
      步骤:
      1. 取粉末培养基溶于700 ml milli-Q 水中,搅拌使其溶解。
      2. 称取适量之NaHCO3 粉末(数量依培养基种类而异,表一)溶于200mlmilli-Q 水中,搅拌使其溶解,然后通入CO2 气体至饱和,约3-5 分钟。
      3. 将溶解且含饱和CO2 之NaHCO3 溶液加入溶解之液体培养基中混合。混后溶液之pH 应为7.2-7.4,除非pH 值偏差太大,否则不需用酸碱再调整之。
      若为太碱,可再通入CO2 气体调整pH。培养基以真空帮浦通过过滤膜时,H 会升高0.1-0.2。
      4. 以0.1 或0.2 mm 无菌过滤膜过滤灭菌,同时分装至无菌容器中,标示培养基种类、日期、瓶号等,贮存于4 oC。(血清亦可加入培养基中一起过滤)
      5. 配制之培养基配制须作生长试验与污染测试。 

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