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Trizol注意事项
发布日期:2020-07-01 浏览次数:2858
注意事项:
- Trizol试剂含有苯酚,具有毒性和刺激性,注意操作。如皮肤接触Trizol,请立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。
- RNase污染的主要来源是操作过程中手和空气中的浮沉,注意随时勤换手套,样品尽可能盖严;尽量不要对着RNA样品呼气或说话。用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(体积比) diethyl- pyrocarbonate(DEPC)至重或MiliQ级水中,处理过夜,灭菌即成DEPC水。
- 细胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不*会降低z后得率,因为一部分RNA会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质(结缔组织和骨除外)。在清洗和裂解细胞时在低温下操作,防止在操作过程中释放的内源RNase降解了RNA。
- 酵母和一些细菌由于细胞壁的特殊结构,可以加入TRNzol试剂同时加入无RNase的玻璃珠并剧烈振荡,使细胞裂解充分。
- TRNzol试剂也适合于样品和组织裂解液的贮存,这尤其适合于同时处理样品较多或操作较为费时时。
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