Trizol疑难解答

发布日期：2020-07-01      浏览次数：748

一：低得率

A：样品裂解或匀浆处理不*；匀浆不*时，基因组DNA分子仍然很大，溶液粘稠。变性的蛋白质和基因组DNA一起形成絮状凝集物容易包裹RNA，使之不能有效地释放到溶液中。

B：沉淀不*：从小于≤2×105动物细胞、≤2 mg动物组织或RNA含量低的样品中提取RNA时，匀浆体积太大，将造成RNA过分稀释而不能有效地沉淀下来。当从这样的样品中提取RNA时，应按比例减少抽提溶液，异丙醇沉淀后延长冰浴和离心时间，具体实验参数见相应操作步骤。加入少量糖原可提高RNA产量又不影响RT-PCR。

C：z后得到的RNA沉淀未*溶解

二：A260/A280<1.65

A．检测吸光度时，RNA样品不是溶于TE，而是溶于水。低离子浓度和低pH条件下，A280值会较高。

B．样品匀浆时加的试剂量太少。

C．匀浆后样品未在室温放置5分钟。

D．水相中混有有机相。

E．z后得到的RNA沉淀未*溶解。