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ELISA试剂盒实验检测样本处理方法

  • 发布日期:2020-06-29      浏览次数:50
    • 今天文韧生物为科研朋友介绍ELISA试剂盒实验检测样本处理方法的介绍。

      一、血清

          对于血清样本的处理,都是离心取上清液待检,在做预实验过程中,血清样本稀释5倍直接进行实验。室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

      二、血浆

          应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

      三、尿液

          用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

      四、粪便样本的处理方法
          对于粪便样本的处理,一般要求采集干的粪便,稀的粪便不利于检测(对样本处理带来难度,也会使准确性降低)。

          粪便样本处理如下:
          ① 收集:直接用医院临床收集粪便的耗材进行收集;

          ② 采样:一般选取的重量不能低于50mg,以1g为基准。称取1g加9ml的PBS(磷酸盐缓冲液,PH控制在7.2-7.4,浓度为0.01mol/L)换算成匀浆的比例就是10%;

          ③ 保存:匀浆后的样本如果采样周期在1周之内,可以保存在2-8℃,如果取样周期在一个礼拜以上一个月以内,-20℃保存。如果取样周期超过1个月,保存在-80冰箱!低温保存的话,尽量避免反复冻融。

      五、组织标本
          切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

          植物组织的提取,不管是根茎组织还是叶片组织还是果实组织,都应该采用鲜重的计重方式,一般要遵循以下原则:

          ① 称取的组织重量不能低于50mg。
          ② 匀浆的比例按照10%,即1g组织加9ml的匀浆液,匀浆液一般选取PBS(PH=7.2-7.4)
          ③ 组织在匀浆器匀浆过程中,匀浆液应该分2次加进去,这样匀浆更充分。
          ④ 充分匀浆完成后离心取上清,离心机的转数选取2000-3000转每分,转数不宜超过5000.离心时间为15-30分钟。

      六、细胞培养上清

          检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

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