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ELISA试剂盒的操作法

  • 发布日期:2020-06-24      浏览次数:81
    • 上海文韧生物科技有限公司常年供应ELISA试剂盒,为保证实验的成功,运用ELISA试剂盒时一定要注意相关的事项,今日,我们首要介绍人白介素ELISA试剂盒操作步骤。

      1. 确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目。

      2. 将倍比稀释的规范品各0.1ml顺次参加一排7孔中,1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔参加。

      3. 酶标板加上盖,37℃反响90分钟。

      4. 反响后用自动洗板机吸去酶标板内的液体;或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下。洗刷2次。

      5. 将准备好的生物素抗体工作液按每孔0.1ml顺次参加。37℃反响60分钟。

      6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷3次,每次浸泡1分钟左右。

      7. 将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml顺次参加。37℃反响30分钟。

      8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷5次,每次浸泡1-2分钟左右。

      9. 按每孔0.1ml顺次参加TMB显色工作液,37℃避光反响,反响过程中,要常常的调查,当肉眼可见规范品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔差别不明显时,即可参加TMB终止液0.1ml/孔。(显色反响长不要超越30分钟)。

      10. 用酶标仪在450nm测定O.D.值。

      11. 依据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也能够运用各种应用软件来核算。应记住由于样品稀释了N倍,其实际浓度应该×N。

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