关于PAA胎牛血清的灭活与分装的方法:
1、化冻
将血清从-20度冰箱中取出,室温(或浸于自来水中)化冻(约需要30分钟至2小时,也可放于4度冰箱化冻一夜;化冻后若不马上灭活,可以放入4度冰箱中暂时保存)
2、灭活
(1)放入室温的水浴锅内开始加热(同时放入一个空的血清瓶,内装100ml自来水,插入一根温度计,温度监控以此为准)
(2)当温度计显示56度时,停止加热,改为间断加热,维持56度(±0.5度)30分钟(±3分钟;若不小心使温度上升超过56度,则:若仍未超过60度,且时间很短,比如不超过5分钟,则仍可使用;若超过60度,或者时间较长,则弃去不用,或者尝试用于一些普通细胞的培养)
(3)取出,自然冷却至室温(约需1-3小时),可分装或-20度继续冻存。
3、分装
(1)转入无菌间,在超净台内将血清分装入10ml离心管中(注意预先要将血清轻轻摇动数周、混匀;用吸液管或吹大管吹出血清时要注意:不要吹出气泡(血清很粘稠,很容易产生气泡;如果产生气泡,则在酒精灯火焰上过一下))
(2)放入-20度冰箱冻存
(3)全部操作约需要4-6小时