CaEs-17人食管癌细胞（含STR）

CaEs-17人食管癌细胞（含STR）

CaEs-17人食管癌细胞（含STR）需要不断供给氧气和排除二氧化碳，植物细胞与此相反。二氧化碳的作用：调节pH，有缓冲作用，没有刺激动物细胞呼吸的功能。

简言之，即细胞需要什么就提供什么，道理是如此，真正能做到这点尚需时日，人们至今对细胞的生命周期控制机理认识不足，癌细胞虽然也来自正常细胞，但至今不知道究竟为什么癌细胞很难停止已经启动的有害分裂，尽管如此，人们长期的研究结果表明，离体细胞培养需要的基本条件就是下列细胞生理条件。

1. 温度：温度过低时细胞生长缓慢甚至不生长。利用冷冻保藏细胞可保持细胞的原有分裂分化能力。温度过高导致细胞死亡。这主要是由酶和蛋白质所需要的适温度决定的。多数生物大分子遇到高温后容易导致空间结构改变或者丧失（变性）。细胞膜遇到高温后容易变化。在自然界，既有耐高温的恒温培养箱恒温培养箱细胞，也有耐低温的细胞。在情况下生长的生物对付环境的机制研究在生物进化和农业、环保、发酵工业中意义重大。

2. pH：过酸或过碱可导致细胞死亡。这主要与蛋白质的变性和细胞膜的结构受损有关。

3. 透压：细胞内外可溶于水的物质比例和种类决定细胞的膨胀与收缩程度，因为细胞膜是半透膜，只允许对自己有利的物质通过。

同一物质在细胞内外的分布的数量不同，当某一种极溶于水的物质在细胞外浓度过大时，有可能导致细胞干瘪死亡，这些物质在细胞内过多时导致细胞过量吸水膨胀。细胞膜调节渗透压的能力是有限的。

4. 养物：营养物和水一起，又叫细胞培养液，培养液中含有细胞增殖和生长所需要的各种物质。营养物包括：N 源、C源，这些物质与提供能量有关；无机盐、维生素、激素，这些物质与代谢调节控制有关。细胞培养液的设计一直是细胞离体培养技术的关键。

理想的细胞培养液可以同时解决细胞离体培养所需要的pH、渗透压、营养物、调节物质的全部需要。在干细胞分化研究与应用中，关键是找到一种使干细胞分化成为所需细胞和组织的营养液。相同的人干细胞，放在不同的营养液中分化培养出人的各种脏器，这个昔日的梦想已经开始成为现实。

植物细胞的组织培养技术已经基本完善配套。名贵花卉、中草药、脱毒马铃薯、组织培养莲菜苗等植物细胞与组织培养技术的不断完善，特别是由于组织培养液的商品化已经被广大农民普遍接受。

5. 水：水是细胞需要数量大的物质，不同的物种、不同部位、不同生长期的细胞含水量差别相当大。干旱植物细胞的含水量高达90%。水的需求量一般随同细胞培养液一起考虑。

6. 无菌条件：体外细胞培养仅仅是对所需的细胞进行培养，但环境中（如空气）有各种其他微生物，必须对所需细胞进行无杂菌的隔离培养。无菌条件是细胞离体培养基本的条件。

7. 光：植物细胞和少数细菌需要利用光进行光合作用。

8. 气体:动物细胞需要不断供给氧气和排除二氧化碳，植物细胞与此相反。

二氧化碳的作用：调节pH，有缓冲作用，没有刺激动物细胞呼吸的功能。

CaEs-17细胞,人食管癌细胞传代方法：

   细胞*汇合时，倒掉旧液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，显微镜下观察细胞*脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶，加培养基混匀分瓶，T25瓶中加培养基至6-8ml，T75瓶加培养基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培养。
   收到细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若有悬浮的细胞，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清，刚接到细胞时血清浓度可以在15％。本产品经过了细菌、真菌、霉菌、病毒（HIV、HBV、HCV）、支原体检测。
我们将为客服提供全面的细胞计数、细胞染色、（MTT）比色法、细胞培养、细胞污染、常规生物材料细胞毒性实验等等细胞实验技术服务。
细胞复苏的原则－快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。

具体操作：

（一）实验前准备： 1．将水浴锅预热至37℃ 2．用75％酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。 3．在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。
（二）取出冻存管： 1．根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。 2．从液氮罐中取出细胞盒，取出所需的细胞，同时核对管外的编号。
（三）迅速解冻： 1．迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化。 2．约1-2min后冻存管内液体*溶解，取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，再拿入超净台内。
（四）平衡离心：用架盘天平平衡后，放入离心机中3000r/min 离心3min。
（五）制备细胞悬液： 1．吸弃上清液。 2．向离心管内加入10ml培养液，吹打制成细胞悬液。 （六）细胞计数： 细胞浓度以5×105/ml为宜。
（七）培养细胞 将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内，将培养瓶放入37℃和5％CO2的培养箱内2-4小时（或者24-48小时）后换液继续培养培养，换液的时间由细胞情况而定。
初学者易犯错误： 1．水浴锅未预热或者未预热到37℃。 2．水浴锅内冻存管太多，导致传热不佳，使融化时间延长。 3．离心前忘记平衡，导致离心机损坏和细胞丢失。 4．一次复苏细胞过多，忘记更换吸头和吸管，导致细胞交叉污染。

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