DC2.4小鼠树突状细胞通过str1）来源：详细资料请咨询上海文韧生物2）含量：1x106 个/mL3）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装气相：空气，95%；CO2，5%
产品时间：2020-04-02
访问量：597
厂商性质：经销商
DC2.4小鼠树突状细胞通过str
细胞名称 | DC2.4小鼠树突状细胞通过str |
种属 | 小鼠 |
细胞来源 | ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
传代 | 1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养ye去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换ye以及传代，一般2天换一次ye； 2.待细胞长满瓶底面积80%，需要对其进行传代，传代比例为1:2到1:3； 3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化ye置于室温预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于室温孵育消化（*次消化需置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为*消化时间，记录*消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml*培养基终止消化。用移ye枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后收集细胞悬ye，1000rpm离心3min，弃上清，加入*培养基重悬细胞，进行传代。（具体根据随货说明书进行操作） |
保存 | 冻存条件：*培养基+FBS+DMSO (备注：建议使用本公司的培养条件，用4度保存的冷冻ye直接重悬细胞，不能预热后使用。) 保存条件：yedan存储 |
供应限制 | 仅供研究之用 |
常见问题及解决方案 | 1.培养瓶有破裂，培养ye有漏ye：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间长不宜超过 72 小时） 3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养ye培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养ye继续培养，中间注意观察， |
新买到的细胞一定要多保种几支，以免玉石俱焚。有些细胞对传代数有要求，所以保种弥足珍贵，这样一旦你养的状态不好了，可以复苏新的。
对试剂的要求
血清好坏是关键，国产的真的效果不太好啦。建议有条件的尽量买进口的，切记要找一级代理购买，可以去网上鉴别真伪，我们实验室上次购买的国外很较有名的牌子的血清，居然查不到批号，结果我们直接封了代理公司。推荐几个比较不错的血清厂家Gibco、Hyclone、BI（不是打广告）。血清开盖后建议分装储存，以防反复冻融（小窍门：可以分装到若干个50ml和10 ml的EP管中，配置培养基时正好每500ml一瓶的培养基中加入一管50 ml和一管10ml的血清，即可配成10%血清的培养基）。有的血清在融化后会有析出，建议一定要离心，去除杂质后再配置培养基，不然养出的细胞看着背景不干净。
另：自配溶液一定要用超纯水配置。
加快增殖
细胞较少时，会长的比较慢，往往越往后会群集性生长，导致接触抑制（竞争抑制），抑制了增殖速率，状态也较差。此时可以将其消化处理，然后重铺于新换的培养瓶培养，会收到很好的效果。当然也可以适当提高一点血清浓度，促进生长，但通常不建议这样长期培养。
降低对细胞的刺激
养细胞要比对待女朋友更贴心，培养基以及血清浓度要根据细胞网站的说明书选择；培养基、胰酶、PBS使用前均需在水浴锅37°C预热，这样可以减少对细胞的刺激，利于其保持状态。一些正常组织的细胞（非改造过的）不仅生长缓慢，而且非常脆弱，除了上面说的适宜的培养环境、试剂预热外，还要降低胰酶浓度，以减少对细胞的损伤。消化时间也要特别注意，尽量在细胞收缩而未脱落时终止消化，然后将细胞吹打下来。
要根据细胞特性因地制宜，如令很多人头疼的RAW264.7细胞，不当处理或者传代太多都会导致其分化、长出伪足，所以除了初期保种外，细胞传代不要用胰酶消化，直接用枪吹打下来即可，这样可以降低损伤。
上海文韧生物科技有限公司
17821213505（大区）
17717378624
