ANA-1小鼠巨噬细胞（通过str）1）来源：详细资料请咨询上海文韧生物2）含量：1x106 个/mL3）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装气相：空气，95%；CO2，5%
产品时间：2020-04-01
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厂商性质：经销商
ANA-1小鼠巨噬细胞(通过str）
细胞名称 | ANA-1小鼠巨噬细胞(通过str） |
种属 | 小鼠 |
细胞来源 | ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
传代 | 1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养ye去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换ye以及传代，一般2天换一次ye； 2.待细胞长满瓶底面积80%，需要对其进行传代，传代比例为1:2到1:3； 3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化ye置于室温预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于室温孵育消化（*次消化需置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为*消化时间，记录*消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml*培养基终止消化。用移ye枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后收集细胞悬ye，1000rpm离心3min，弃上清，加入*培养基重悬细胞，进行传代。（具体根据随货说明书进行操作） |
保存 | 冻存条件：*培养基+FBS+DMSO (备注：建议使用本公司的培养条件，用4度保存的冷冻ye直接重悬细胞，不能预热后使用。) 保存条件：yedan存储 |
供应限制 | 仅供研究之用 |
常见问题及解决方案 | 1.培养瓶有破裂，培养ye有漏ye：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间长不宜超过 72 小时） 3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养ye培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养ye继续培养，中间注意观察， |
首先进行细胞系STR鉴定是很重要的。很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行，这些细胞可能是受赠于其它研究人员,也可能是从细胞库(如美国 ATCC,American Type Culture Collection)得来。据估计，15-20%的实验室，实验中所使用的细胞已经不是原来的细胞系，或者与其它细胞系发生了交叉污染。显然，细胞系遭到污染、特征鉴别错误，将会极大的威胁着基于这些细胞而发表的论文质量和研究发现的正确性。为此，很多细胞库现在都要对提交来的细胞系进行鉴定，并对细胞系之间的交叉污染进行监测。
现在很多机构都已经认识到这个的重要性，ATCC和FDA，这些机构要求对用于制药领域的实验中所使用的材料 — 诸如细胞系 — 应该进行“身份鉴定”和纯度测试。很多杂志也要求使用细胞系的文章提供STR指纹图谱数据。
FDA建议研究人员在培养细胞的较早阶段(细胞培养di一周)来鉴定细胞系的身份。细胞在被冻存前应再一次进行鉴定；对于活跃生长的细胞，每两个月应鉴定一次；文献发表前也应对细胞系身份进行鉴定。
如果一个实验室使用不止一种细胞系，则应在实验开始时，就要对所有的细胞系进行鉴定，以便排除交叉污染。
这样将减少由于细胞系发生交叉污染或身份误认，将导致实验数据的无效或数据误导
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