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人乳腺癌细胞ZR-75-1

简要描述:

上海文韧细胞库为您提供人乳腺癌细胞ZR-75-1(复苏细胞、冻存细胞)具体细胞培养条件,代数以及来源问题请与在线客服联系咨询。提供耐药细胞株,肿瘤细胞,正常细胞,小鼠细胞,大鼠细胞,牛细胞等动物细胞
1)来源:详细资料请咨询
2)含量:1x106 个/mL
3)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃

产品时间:2020-03-14

访问量:559

厂商性质:经销商

上海文韧生物科技有限公司更多人乳腺癌细胞ZR-75-1科研人AB血清、进口血清、国产血清,豚鼠血清、兔血清、绵羊血清、山羊血清、封闭驴血清、大鼠血清、小鼠血清,多种细胞株,atcc原代细胞,培养基,抗体,胰酶,试剂盒,各类试剂等 

人乳腺癌细胞ZR-75-1

安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。

若客户收到2ml小管细胞:收到细胞以后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后将小管细胞转移至T25培养瓶,加入5ml左右含FBS的培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞汇合度:若未超过80%汇合度,换液继续培养,根据情况传代或者冻存。若超过80%汇合度,可直接进行传代(细胞贴壁处理方法)。

冻存细胞处理方法:

收到细胞后,检查外包装是否完整,干冰是否完好,细胞冻存管是否完好且未溶解。如有破损、溶解等问题,细胞若不立即复苏,请将细胞置于液氮中保存。若复苏请进行以下操作:

1. 75%酒精喷冻存管后,用干净的纸或酒精棉球擦拭冻存管,放入超净台。

2. 预热细胞*培养基,准备一根新的15mL 无菌离心管和一个无菌的 T25 细胞培养瓶。

3. 将 5ml *培养基添加到 T25 细胞培养瓶,备用。将 5ml *培养基添加到 15ml 离心管中,备用。

4. 准备 37℃水浴,迅速取出细胞,将冻存管放入水浴中快速摇晃使之融化。

5. 融化*后的冻存管酒精棉球擦拭,在超净台中打开冻存管,用 1mL 移液器将细胞悬液取出,加入到准备好的含培养基的离心管中,混匀,放入离心机中, 1200rpm 离心3-5min。

6. 离心停止后取出离心管,小心地弃上清液,加入 1ml *培养基,轻吹打混匀成悬液,全部吸取转移到步骤 3 中准备的 T25 细胞培养瓶中,混匀后放置37℃,5%CO2 培养箱培养。

7. 次日于显微镜下观察细胞状态,视情况可换液或直接传代实验。

复苏细胞一般采用快速融化法,以保证细胞外结晶快速融化,以避免慢速融化水分渗入细胞内,再次形成胞内结晶损伤细胞。

注:收到细胞后请及时处理,一周内发现细胞异常,请及时联系并提供相关图片及说明!

贴壁细胞的传代:对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。悬浮细胞的传代:一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。

1.打开水浴锅, 预热到37度

2.从液氮罐中出冻存的细胞,迅速放入37度水浴锅 快速溶解

3.在超净台中,把溶解的细胞移入离心管,(离心管内先加入2ML左右的培养基).1000RPM 离心5分钟

4.弃上清,加入1ML培养基,吹打均匀,移入培养瓶内,(培养瓶内先加入4-5ML培养基)37度过5%CO2培养箱培养  

细胞冻存

1.将细胞消化下来,移入离心管离心,弃上清

2.准备冻存液比例:50%FBS+40%培养基+10%DMSO(现用现配)

3.加1.5冻存液在离心管中,将细胞吹打均匀,移入冻存管内.

放入-20度冰箱2-4小时后.再放入-80度冰箱过夜,第二天放入液氮罐保存

 上海文韧生物科技有限公司

 

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