产品展示
PRODUCT DISPLAY
产品展示您现在的位置: 首页 > 产品展示 > ELisa > 人ELISA试剂盒 >人的骨形成蛋白6ELISA试剂盒

人的骨形成蛋白6ELISA试剂盒

简要描述:

人的骨形成蛋白6ELISA试剂盒文韧生物科技供应国内外知名品牌血清,试剂盒,胎牛血清,猪血清,马血清,新生牛血清,驴血清豚鼠血清,人血清,人AB血清,主要品牌有Hyclone,NTC,Gemini,SBI,PAN等,其中胎牛血清,囊括:普通胎牛血清,优等胎牛血清,炭吸附胎牛血清,透析胎牛血清,四环素胎牛血清,干细胞专用血清,超低IgG胎牛血清,热灭活胎牛血清等

产品时间:2020-04-20

访问量:33

厂商性质:经销商

人的骨形成蛋白6ELISA试剂盒Human BMP-6 ELISA KIT  

关键词搜索: 大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,ELISA检测试剂盒,ELISA试剂盒,豚鼠ELISA试剂盒,兔ELISA试剂盒,羊ELISA试剂盒,牛ELISA试剂盒,鸡ELISA试剂盒,鸭ELISA试剂盒,植物ELISA试剂盒,昆虫ELISA试剂盒,猪ELISA试剂盒

人的骨形成蛋白6ELISA试剂盒Human BMP-6 ELISA KIT  

试剂的性质

(一) 基本原理 ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。因此,可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应,颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)检测仪进行定量测定,这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来,使ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)方法成为一种既特异又敏感的检测方法。

(二) 用于标记的酶 用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室温下稳定;反应产物易于显现;能商品化生产。应用较多的有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP应用zui广。

1.辣根过氧化物酶(HRP) 过氧化物酶广泛分布于植物中,辣根中含量zui高,从辣根中提取的称辣根过氧化物酶(HRP),是由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉构成的一种糖蛋白(含糖量18%),分子量约40 000,约由300个氨基酸组成,等电点为pH 3-9,催化反应的zui适pH值因供氢体不同而稍有差异,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%饱和度以下的硫酸铵溶液。酶蛋白和辅基的zui大吸收光谱分别为275nm和403nm。

酶的纯度以RZ表示:RZ=OD403/OD275

纯酶的RZ多在3.0以上,zui高为3.4。RZ在0.6以下的酶制品为粗酶,非酶蛋白约占 75%,不能用于标记。RZ在2.5以上者方可用于标记。HRP的作用底物为过氧化氢,催化反应时的供氢体有几种:(1)邻苯二胺(OPD),产物为橙色,可溶性,敏感性高,zui大吸收值在490nm,可用肉眼观察判别,容易被浓硫酸终止反应,颜色可在数小时内不改变,是国内ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)中zui常用的一种;(2)联大茴香胺(OD),产物为橘黄色,zui大吸收值在400nm,颜色较稳定;(3)5-氨基水杨酸(5-AS):产物为深棕色,zui大吸收值在450nm,部分溶解,敏感性较差;(4)邻联甲苯胺(OT)产物为蓝色,zui大吸收值在630nm,部分溶解,不稳定,不耐酸,但反应快,颜色明显。

2.碱性磷酸酶 系从小牛肠粘膜和大肠杆菌中提取,由多个同功酶组成。它们的底物种类很多,常用者为硝基苯磷酸盐,廉价无毒性。酶解产物呈黄色,可溶,zui大吸收值在400nm。酶的活性以在pH10反应系统中,37℃1分钟水解1μg磷酸苯二钠为一个单位。

(三) 抗体的酶标记方法及标记效果测定

1.标记方法 良好的酶结合物取决于两个条件:即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,zui好使用亲和层析提纯的抗体,可提高敏感性,而且可稀释使用,减少非特异性吸附。

酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30分钟 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室温放置30分钟后加入含5(g纯化抗体的水溶液1ml,混匀并装透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸盐缓冲液于4℃冰箱中慢慢搅拌透析6小时(或过夜)使之结合,然后吸出,加(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小时,将上述结合物混合液加入等体积饱和硫酸铵溶液,置4℃冰箱30分钟后离心,将所得沉淀物溶于少许0.02mol/L、pH7.4PBS中,并对之透析过夜(4℃),次日离心除去不溶物,即得到酶标抗体,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,进行测定后,冷冻干燥或低温保存。

2.酶标抗体标记效果测定:测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。

(1) 酶与抗体的活性 常用琼脂扩散或免疫电泳法,使抗原与抗体形成沉淀线,经PBS漂洗1天,再以蒸馏水浸泡1小时,将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色,如果出现应有的颜色反应,再用生理盐水浸泡,颜色仍然不褪,表示结合物既有酶的活性,也有抗体活性。良好的结合物在显色后,琼扩滴度应在1:16以上。另一个测定方法是用系列稀释的酶标抗体直接以ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)方法进行方阵滴定,此法不仅可以测定标记效果,还可以确定酶标抗体的使用浓度。

(2) 结合物的定量测定 一般是对结合物中的酶和IgG进行定量测定。常用紫外分光光度计于403nm和280nm进行测定,然后按下列公式计算:

酶量(mg/ml)=OD403×0.42

IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62

对于过碘酸钠氧化法制备的标记抗体量,按下列公式计算:

IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.34)×0.62

已知酶量和IgG量后,即可计算出标记抗体的摩尔(mol)比值。

HRP/IgG摩尔比值=HRP(mg/ml)/IgG(mg/ml)×4

结合物中酶总量=HRP(mg/ml)×结合物溶液量

结合物产率=结合物中酶总量/标记时加入的酶量×100%

用于ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)的结合物的酶量为400(g/ml时效果一般,为500(g/ml时效果较好,达 1000(g/ml时效果zui好。mol.比值由于结合物中含的IgG并不完全可靠,所以不能作为主要参数。一般认为mol.比值为0.7时效果一般,1.0时效果较好,1.5-2.0时zui好。酶结合率为 7%时效果一般,为9%-10%较好,达30%以上时zui好。(四) ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)方法的基本类型、用途及操作程序

试剂盒的类型

根据ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)所用的固相载体而区分为三大类型:一是采用聚苯乙烯微量板为载体的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒),即我们通常所指的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)(微量板ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒));另一类是用硝酸纤维膜为载体的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒),称为斑点ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)(Dot-ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒));再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒),称为布ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)(C-ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒))。在微量板ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)中,又根据其性质不同分为间接ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、双抗体夹心ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、双夹心ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、竞争ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、阻断ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)及抗体捕捉ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)。

相关产品:

SERANA胎牛血清FBS S-FBS-SA-011 SOUTH AMERICA

SERANA胎牛血清FBS S-FBS-SA-015 SOUTH AMERICA

SERANA胎牛血清FBS S-FBS-US-015 USA

SERANA人血清,Human Serum S-HU-US-011 USA

SERANA人AB血清Off the clot, Type AB S-HU-US-021 USA

SERANA超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS S-FBS-SA-055 SOUTH AMERICA

SERANA透析胎牛血清Dialyzed FBS S-FBS-US-065 USA

SERANA活性炭/葡聚糖处理胎牛血清Charcoal Stripped FBS S-FBS-AU-045 AUSTRALI

BOVOGEN胎牛血清FBS SFBS SOUTH AMERICA

BOVOGEN胎牛血清FBS SFBS New Zealand

BOVOGEN新生牛血清New born calf serum SNCS New Zealand

PAA 普通胎牛血清FBS A15-101 EU

PAA 优等胎牛血清FBS A15-151 EU

BI优等胎牛血清 04-001-1ACS SOUTH AMERICA

BI ES级别胎牛血清 04-002-1A SOUTH AMERICA

BI 间充质干细胞专用胎牛血清 04-400-1A SOUTH AMERICA

Sigma 特级胎牛血清 F2442 USA

Corning CellGro康宁优等胎牛血清 35-076-CV AUSTRALIA

PAN胎牛血清FBS P30-3302 SOUTH AMERICA

PAN胎牛血清FBS ST30-3302 SOUTH AMERICA

PAN ES级别胎牛血清 ST30-2602 SOUTH AMERICA

NTC优等胎牛血清 SFBE 阿根廷

Gemini优等胎牛血清 900-108 SOUTH AMERICA

Gemini特级胎牛血清 100-500 USA

Sigma正常人AB血清 H4522 USA

SBI 无外泌体血清 EXO-FBS-50A-1 USA

SR 无外泌体血清 S-EXO-SR-50

人的成纤维生长因子21 Human FGF-21 ELISA KIT 96T/48T

人的成纤维生长因子23 Human FGF-23 ELISA KIT 96T/48T

人的骨形成蛋白2 Human BMP-2 ELISA KIT 96T/48T

人的骨形成蛋白6 Human BMP-6 ELISA KIT 96T/48T

人的骨形成蛋白9 Human  BMP-9 ELISA KIT 96T/48T

人的硬骨素又名骨硬化蛋白 Human SOST/Sclerostin ELISA KIT 96T/48T

人的嗜酸粒细胞趋化蛋白 Human CCL11/Eotaxin ELISA KIT 96T/48T

人的巨噬细胞炎症蛋白3β Human CCL19/ MIP-3 ELISA KIT 96T/48T

人的次级淋巴组织趋化因子 Human CCL21/6Ckine ELISA KIT 96T/48T

人的趋化蛋白12 Human CXCL12/SDF-1  ELISA KIT 96T/48T

人的趋化蛋白14 Human CXCL14  ELISA KIT 96T/48T

人的巨噬细胞炎性蛋白1α Human CCL3/MIP-1αELISA KIT 96T/48T

人的巨噬细胞炎性蛋白1β Human CCL4/MIP-1βELISA KIT 96T/48T

人的正常T细胞表达和分泌因子 Human CCL5/RANTESELISA KIT 96T/48T

人的脂联素 Human Adiponectin ELISA KIT 96T/48T

人的胰岛素 Human insulin ELISA KIT 96T/48T

人的瘦素 Human Leptin ELISA KIT 96T/48T

人的脂肪因子 Human total Vaspin ELISA KIT 96T/48T

人的内脏脂肪素 Human visfatin ELISA KIT 96T/48T

人的载脂蛋白E Human apoE ELISA KIT 96T/48T

人的鸢尾素 Human Irisin ELISA KIT 96T/48T

人的干细胞因子 Human SCF ELISA KIT 96T/48T

人的胰岛素样因子1 Human IGF-1 ELISA KIT 96T/48T

人的神经生长因子β Human β-NGF ELISA KIT 96T/48T

人的胶质细胞来源的神经营养因子 Human GDNF ELISA KIT 96T/48T

人的巨噬细胞迁移抑制因子 Human MIF ELISA KIT 96T/48T

人的白细胞活化黏附因子 Human ALCAM ELISA KIT 96T/48T

人的肝细胞因子 Human HGF ELISA KIT 96T/48T

人的肿瘤坏死因子β Human TNF-β ELISA KIT 96T/48T

人巨噬细胞刺激蛋白 Human MSP ELISA KIT 96T/48T

人血管细胞粘附蛋白1 Human VCAM-1 ELISA KIT 96T/48T

人的抵抗素 Human Resistin ELISA KIT 96T/48T

人血管生成素 Human Angiogenin ELISA KIT 96T/48T

人凝血因子III/组织因子 Human Coagulation Factor III/Tissue Factor ELISA KIT 96T/48T

人的D因子 Human Complement Factor D ELISA KIT 96T/48T

人细胞间粘附分子1 Human sICAM-1 ELISA KIT 96T/48T

人纤溶酶原激活物抑制剂1 Human Serpin E1/PAI-1 ELISA KIT 96T/48T

人的可溶性细胞分化抗原14 Human CD14 ELISA KIT 96T/48T

人的降钙素原 Human PCT ELISA KIT 96T/48T

人的胱抑素C Human Cys-C ELISA KIT 96T/48T

人的C反应蛋白 Human CRP ELISA KIT 96T/48T

人C反应蛋白(超敏) Human High sensitive CRP ELISA KIT 96T/48T

人的髓系细胞触发受体1 Human TREM 1 ELISA KIT 96T/48T

人的干扰素α Human IFN-α ELISA KIT 96T/48T

人的正五聚蛋白-3 Human  Pentraxin 3/TSG-14  ELISA KIT 96T/48T

Human AXL ELISA KIT 96T/48T

人的肽受体酪氨酸激酶 Human Total Mer ELISA KIT 96T/48T

人的铁调素 Human hepcidin ELISA KIT 96T/48T

人的热休克蛋白70 Human HSP70 ELISA KIT 96T/48T

人的促红细胞生成素 Human EPO ELISA KIT 96T/48T

人的S100B蛋白 Human S100B ELISA KIT 96T/48T

人的血管性血友病因子 Human vwF ELISA Kit 96T/48T

人的卵泡抑制素样蛋白1 Human FSL-1 ELISA Kit 96T/48T

 

 

 

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
在线客服