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防止胎牛血清在培养中生成黑点的有效方法,值得一看!

  • 发布日期:2020-12-28      浏览次数:260
    • (1) 尽可能地减少血清冻融次数。 
      (2) 培养基无需 37℃水浴。 
      (3) 培养基保持JIA PH 值 7.0- 7.2。 
      (4) 严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗。 
      (5) 掌握细胞传代的JIA时机,细胞切勿生长过老。
      1、 化冻
      将血清从-20 度冰箱中取出,室温(或浸于自来水中)化冻(约需要 30 分钟至 2 小时,也可放于 4 度冰箱化冻过夜;化冻后若不马上灭活,可以放入 4 度冰箱中暂时保存) 
      2、灭活 
      (1)放入室温的水浴锅内开始加热(同时放入一个空的血清瓶,内装 100ml 自来水,插入一根温度 计,温度监控以此为准) 
      (2)当温度计显示 56 度时,停止加热,改为间断加热,维持 56 度(±0.5 度)30 分钟(±3 分钟; 若不小心使温度上升超过 56 度,则:若仍未超过 60 度,且时间很短,比如不超过 5 分钟,则仍可使 用;若超过 60 度,或者时间较长,则弃去不用,或者尝试用于一些普通细胞的培养) 
      (3)取出,自然冷却至室温(约需 1-3 小时) ,可分装或-20 度继续冻存。
       3、分装 
      (1)转入无菌间,在超净台内将血清分装入 10ml 离心管中(注意预先要将血清轻轻摇动数周、混匀; 用吸液管或吹大管吹出血清时要注意:不要吹出气泡(血清很粘稠,很容易产生气泡;如果产生气泡, 则在酒精灯火焰上过一下) ) 
      (2)放入-20 度冰箱冻存 
      (3)全部操作约需要 4-6 小时

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