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冻存EH-GB1人胆囊癌细胞是否有必要坚持缓冻原则

  • 发布日期:2020-09-01      浏览次数:149
    • 冻存EH-GB1人胆囊癌细胞是否有必要坚持缓冻原则

      一、我们先来说说何为缓冻:
             缓冻即为冻存细胞时,要程序降温——4℃ 30min,-20℃ 1h ,-80℃ 过夜,次日投入液氮内。

      二、那为什么要进行缓冻呢?
             其实所谓的缓冻是一般使用传统冻存液冻存过程中需要程序降温。
             传统的冻存液,一般由胎牛血清、DMSO及基础培养基等组分组成。冻存保护的DMSO组分,在进入细胞后结合细胞内部的水份,降低冰点,防止细胞在冷冻过程中形成冰晶对细胞造成损害。
             但是DMSO只能在细胞内部保护细胞,细胞外部没有保护,水结冰晶会在细胞膜外部受到损伤,为了防止冰晶过大,使用时必须采用程序降温的方式,才可保证细胞复苏的成功率(80%以上)。
             若不采用程序降温的形式,有些冻存的细胞,甚至复苏成功率为0。

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