Hyclone M199 SH30253.01培养基制备过程
1.配料
配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。
2.溶解
淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度
95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3.调 PH
用 1N 的盐酸或 1N 的 NaOH 把培养基调节到所要求的值。
4.过滤
滤纸或棉花进行过滤。(有时可以省去) [4]
5.分装
一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
(1)三角瓶
若作静置培养,则 100ml 培养基/250ml 的三角瓶,不能超过 150ml 培养基/250ml 的
三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则 15-20ml 培养基/250ml 的三角瓶,保证通气良好。
(2)试管分装
液体培养基一般装 4-5ml,约试管的 1/4 高度;固体斜面培养基一般装 3-4ml,约试管的 1/5 高度。
6.包扎
分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
7.灭菌
按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养
基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
8.摆斜面
灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的 1/2。