液体培养基中谷氨酰胺的作用及使用方法。
几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。
谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20 ◦C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ◦C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。
培养基中丙酮酸钠的作用是什么?
细胞通常以葡萄糖作为碳源,丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。如果没有足够的葡萄糖供应,细胞就会选择丙酮酸钠作为代谢底物。丙酮酸是糖酵解途径中一个中间产物,也是EM(Embden Myerhoff)途径的D一步,所以培养基中添加的丙酮酸既可以作为能量的来源也可以为细胞的代谢提供碳骨架。
对于某些特殊的细胞,丙酮酸对维持细胞的生存是必需的,丙酮酸对于某些细胞的繁殖和低血清浓度的增殖也是*。
培养基中的丙酮酸钠浓度一般是0.1 mM,商品化的丙酮酸钠一般是10 mM (100X)的溶液。