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如何促进4T1小鼠乳腺癌细胞贴壁

  • 发布日期:2020-08-10      浏览次数:68
    • 如何促进4T1小鼠乳腺癌细胞贴壁

      • 1. 适度消化细胞:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。

      • 2. 用塑料瓶培养,如果是玻璃瓶,那么可以用鼠尾胶原包被一下培养瓶,或者用盐酸对培养瓶进行蚀刻,或者涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA,也可以帮助细胞贴附新的培养瓶,细胞不易贴壁,建议加多聚赖氨酸处理。

      • 3. 正确配制消化液或培养液。

      • 4. 使用合适的细胞外基质或贴壁试剂。

      • 5. 复苏新的细胞,D一周用20%血清帮助细胞复原。

      • 6. 传代接种一定要铺的均匀,避免细胞抱团生长。

      • 7. 细胞传代24小时之内,不要晃动,以免影响贴壁。

      • 8. 体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜上,因此培养在有胶原的底物上有利于生长。人或小鼠表皮细胞培养,可以用γ射线照射后的3T3细胞为饲养层,另外降低pH、Ca2+含量和温度,均有利于上皮细胞生长。

       

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