血清解冻需采用逐步解冻法:将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天,然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),减少沉淀生成。切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻,这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀。
血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),胎球蛋白[1],脂蛋白,冷凝集素,玻连蛋白,磷酸钙(显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。
原因:造成沉淀的主要原因是温度的改变。热灭活,反复冻融,长期储存于2-8℃或者室温。
预防:非必要,不用热灭活;避免反复冻融;-20℃保存;4℃全融(期间间断摇晃均匀);2000rpm离心5分钟(不建议用0.2um滤膜过滤) 。