支原体污染去除
1. 支原体污染预防
根据可能的支原体污染来源,在体外细胞培养过程中,要严格控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和实验器材、耗材要保证无菌;在不影响实验结果的前提下,可在细胞培养基中加入适量的特定抗生素;发现支原体污染后,要清除支原体,防微杜渐。
2. 支原体污染的去除及预防
因为支原体没有细胞壁,一般用于细胞壁合成的抗生素对支原体没有作用,如青霉素、万古霉素多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍没什么效果。对支原体Z有抑制活性及常用于支原体去除的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些氟喹诺酮。在低浓度时,这些抗生素不会产生耐药性,且对哺乳动物细胞的毒性较小。四环素和大环内酯能结合30S和50S核糖体亚基,从而抑制支原体蛋白质合成,喹诺酮抑制DNA旋转酶。因此可以在细菌DNA复制及蛋白质合成两个层面上抑制细菌生长,明显增强除菌效果。
3. 支原体去除试剂选择
选择支原体去除试剂需要注意几个关键几点:
①细胞毒性小,毒性大的试剂在去除支原体的同时,会杀死细胞;
②支原体去除效果,选择广谱试剂,去除多种支原体,以及细菌,真菌等;
③操作简便,没有二次污染;
要考虑操作使用是否方便,因为如果使用起来比较麻烦,首先是费时费力,另外可能会带来二次污染。
Quick Cell支原体预防及去除试剂和Cellmaxin都是从蛋白和DNA两个层面去除支原体,抗菌谱广。不同在于Quick Cell的使用者可以灵活选择单独或联合使用两种成分,分别或同时在蛋白或DNA层面去除支原体污染,细胞毒性更小。作用周期1-2周,支原体去除率大于92%。去除预防兼顾
BM-Cyclin包含泰妙菌素(BM-Cyclin 1)和二jia胺四环素(BM-Cyclin 2)两种成分,抑制支原体及细菌生长,高效去除培养细胞中已感染的支原体。适用于多种培养细胞,无明显副作用,又不影响细胞本身的代谢,而且处理过的细胞不会重新感染支原体。BM-Cyclin需联合使用,作用周期2周,可消除80%以上的支原体。不确定能否预防。
BIOMYC-1基于抗生素泰妙菌素,由真菌pleurotus mutilus 产生。 BIOMYC-2基于二jia胺四环素,四环素衍生物。此两种抗生素溶液通常按先后联合使用2-3次循环约一周以上,可取得良好的效果。BIOMYC-3 基于抗生素环丙沙星,属于氟喹酮类。许多支原体被证明对BIOMYC-3敏感,需要根据支原体种类使用。处理周期2周,能去除90%的支原体。是否可以预防支原体目前还不能确定。
Plasmocin™ prophylactic和Plasmocin™ treatment也是两种抗生素的混合物,包含两个针对支原体的有效成分,作用于蛋白质合成和DNA复制阶段,对许多细菌和真核细胞则没有影响。作用周期2周,去除效率未知。有两个浓度包装,去除用高浓度,预防用低浓度。
文韧生物相关产品细胞代号:
HeLa | 人宫颈癌细胞 |
143B | 人骨肉瘤细胞 |
293T | 人胚肾细胞 |
A2780 | 人卵巢癌细胞 |
A549 | 人非小细胞肺癌细胞 |
A673 | 人尤因肉瘤细胞 |
AGS | 人胃腺癌细胞 |
BGC823 | 人胃腺癌细胞(低分化) |
C33A | 人宫颈癌细胞 |
CACO2 | 人结直肠腺癌细胞 |
COLO205 | 人结肠癌细胞 |
DU145 | 人前列腺癌细胞 |
ES-2 | 人卵巢透明细胞癌细胞 |
H1650 | 人非小细胞肺癌细胞 |
H460 | 人大细胞肺癌细胞 |
HACAT | 人永生化角质形成细胞 |
HCT116 | 人结肠癌细胞 |
HEK293 | 人胚肾细胞 |
HEPG2 | 人肝癌细胞 |
HGC27 | 人胃癌细胞(未分化) |
HT-29 | 人结肠癌细胞 |
HUVEC | 人脐静脉内皮细胞 |
KYSE150 | 人食道癌细胞 |
L02(HL7702)(QSG-7701) | 人正常肝细胞 |
LOVO | 人结肠癌细胞 |
MCF-10A | 人正常乳腺上皮细胞 |
MCF7 | 人乳腺癌细胞 |
LX-2 | 人肝星状细胞 |
MDA-MB-468 | 人乳腺癌细胞 |
MIA Paca2 | 人胰腺癌细胞 |
NCI-H1299 | 人非小细胞肺癌细胞 |
PANC-1 | 人胰腺癌细胞 |
RBE | 人肝胆管癌细胞 |
SAOS-2 | 人成骨肉瘤细胞 |
SiHa | 人子宫颈鳞癌细胞 |
NB 4 | 急性早幼粒细胞白血病细胞 |
SPC-A-1 | 人肺腺癌细胞 |
SW480 | 人结肠癌细胞 |
U-87MG | 人脑星形胶质母细胞瘤细胞 |
ZR-75-1 | 人乳腺癌细胞 |
SW1116 | 人结肠腺癌细胞 |
293A | 人胚肾细胞 |
SGC-7901 | 人胃腺癌细胞 |
Ishikawa | 人子宫内膜癌细胞 |
Eca-109 | 人食管癌细胞 |
RD-ES | 人尤文氏肉瘤 |
NCI-H1437 | 人肺癌细胞 |
HOS | 人骨肉瘤细胞 |
Hela S3 | 人宫颈癌细胞 |
ECC1 | 人宫颈内膜腺癌细胞 |
SUP-B15 | 人Ph+急淋白血病细胞系 |
TF-1 | 人血液白血病细胞 |
NCI-H446 | 人小细胞肺癌细胞 |
GES-1 | 人胃正常黏膜上皮细胞 |
IOSE80 | 人卵巢正常上皮细胞株 |
GIST882 | 人胃肠道间质瘤细胞 |
KGN | 人卵巢颗粒细胞癌 |
U937 | 人组织细胞淋巴瘤细胞 |
SV-HUC-1 | 人膀胱上皮永生化细胞 |
tpc-1 | 人乳头瘤状甲状腺癌细胞 |
hela-luci | Luciferase稳定表达Hela细胞 |
colo320 | 人结肠癌细胞 |
bxpc-3 | 人胰腺腺癌细胞 |
raji | 人Burkitt's淋巴瘤细胞 |
5637 | 人膀胱癌细胞 |
chang-liver | 人肝细胞(已被hela污染) |
a549-gfp | gfp标记的A549细胞 |
hs578.t | 人乳腺癌细胞 |
T24 | 人膀胱移行细胞癌细胞 |
K562 | 人慢性髓系白血病细胞 |
EH-GB1 | 人胆囊癌细胞 |
skov-3 | 人卵巢腺癌细胞 |
ECV304 | 人膀胱癌细胞(T24衍生物) |
nci-n87 | 人胃癌细胞 |
B-CPAP | 人甲状腺癌细胞 |
NCI-H1975 | 人非小细胞肺腺癌细胞 |