人鼠elisa试剂盒不同类型的样本的处理办法

发布日期：2020-06-23      浏览次数：748

正确的处理样本是确保ELISA检测的正确性和准确性的一步，下面简单介绍一下不同类型的样本的处理办法。
血清

血清是常用于ELISA检测的一类样本，处理也比较简单。

用无热原、无内毒素的试管或离心管收集血液标本，将试管或离心管室温放置2小时或4℃一个晚上，使血清分出。（将试管或离心管歪斜放置，使液面横截面增大，能使血清更大程度的分出。）4℃ 1000×g离心20分钟，细心搜集上清。主张将血清分装多份，-20℃或-80℃保存，防止重复冻融。采血过程中应防止溶血，由于红细胞裂解时会开释具有过氧化酶活性的物质，在以HRP为符号的
人鼠elisa试剂盒检测中会有非特异性的显色，而导致检测的不准确性。一起也应防止细菌污染，由于菌体内可能含有内源性的HRP然后导致检测的假阳性。
安排匀浆液

1）将安排样本用PBS (0.01锚点锚点M, PH 7.4) 冲刷，洗去安排外表残留的血液或杂质。

2）将安排块称重，记录后剪碎，碎块应尽量小，便于匀浆得更充沛

3）将安排按必定的份额参加预冷的PBS（临用前参加蛋白酶抑制剂）匀浆，匀浆时置于冰上或冰浴中。

4）吸取匀浆液到离心管，4℃ 5000×g 离心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，防止重复冻融。
尿液、唾液等其他液体生物样本

1000×g离心20min，取上清即可检测。总的来说，由于ELISA只能检测可溶性蛋白的含量，所以应确保一切样本均为澄清的液体，沉积或悬浮物都应离心去除。为了确保检测的准确性，保存于-20℃或-80℃的样本在1~6个月内检测；4℃保存的样本应在1周内进行检测。

细胞裂解液

1）吸去培育板内的培育基，用胰酶消化细胞，加适量培育基将细胞从培育板上吹下来。悬浮细胞可省略。

2）搜集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培育基，用预冷的PBS润洗3次。

3）参加适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前参加蛋白酶抑制剂）重悬细胞。一般6孔板一个孔的细胞量需求150~250μL PBS重悬。

4）将样品放入-20℃或-80℃，使样品冷冻，再放室温解冻样品，重复冻融几回，使细胞充沛裂解。也可将样品进行超声破碎，以到达裂解的意图。

5）4℃ 10000×g 离心10min，除掉细胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，防止重复冻融。