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客户收到SERANA胎牛血清后如何化冻、灭活、分装、储存

  • 发布日期:2020-05-20      浏览次数:320
    • 客户收到SERANA胎牛血清后如何化冻、灭活、分装

      问:ERANA胎牛血清如何化冻?

      答: 将血清从-20度冰箱中取出,室温(或浸于自来水中)化冻(约需要30分钟至2小时,也可放于4度冰箱化冻隔夜;化冻后若不马上灭活,可以放入4度冰箱中暂时保存)

      问:ERANA胎牛血清如何灭活?

      答:(1)放入室温的水浴锅内开始加热(同时放入一个空的血清瓶,内装100ml自来水,插入一根温度计,温度监控以此为准) 

      (2)当温度计显示56度时,停止加热,改为间断加热,维持56度(±0.5度)30分钟(±3分钟;若不小心使温度上升超过56度,则:若仍未超过60度,且时间很短,比如不超过5分钟,则仍可使用;若超过60度,或者时间较长,则弃去不用,或者尝试用于一些普通细胞的培养)

      (3)取出,自然冷却至室温(约需1-3小时),可分装或-20度继续冻存。

      问:ERANA胎牛血清如何分装?

      答:(1)转入无菌间,在超净台内将血清分装入10ml离心管中(注意预先要将血清轻轻摇动数周、混匀;用吸液管或吹大管吹出血清时要注意:不要吹出气泡(血清很粘稠,很容易产生气泡;如果产生气泡,则在酒精灯火焰上过一下))

      (2)放入-20度冰箱冻存

      (3)全部操作约需要4-6小时

      谈SERANA胎牛血清储存事项(适合于所有血清的储存)

      (1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.   

       

      (2)热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.   

       

      (3)SERANA胎牛血清瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.   

       

      (4)SERANA胎牛血清提供的血清均为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.   

       

      (5)SERANA胎牛血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.   

       

      (6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.

       

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