Hyclone胎牛血清热灭活的三大问题解答
Hyclone胎牛血清说明书
1、瓶转Hyclone胎牛血清解冻需采用逐步解冻法：-20℃ 至 -70℃℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全 部
溶解后再分装,一般以50m1无菌离心管可分装40～45m1。在溶解过程 中须规则摇晃均匀（小心勿造成气泡)，使温度 与成分均一，碱少沉淀的发生。.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而 出现沉淀。
2、热灭活是指56*，30分钟加热已*解冻的血清, 加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体 成分灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉 淀物显著增多，而且还会影响血清的质量.补体参与反应有：细胞毒作用，平滑肌细胞收缩，肥大细胞和血小板释放组胺，增强吞噬作用，促进淋巴细胞和巨噬细胞 发生化学趋化和活化。
3、血清中的沉淀物 絮状物：主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些累状物不会影响血清本身 的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除，也可不用处理。 显微镜下“小黑点”：经过热处理过的血清，沉淀物 的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”，常误认为血清受污染。一般情况下，此小黑 点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血清。
Hyclone胎牛血清热灭活的问题：
1、血清热灭活有必要吗？
血清热灭活的步骤在1970年代就已建立，至今成为很多实验室的常规血清前处理步骤；但许多先前认为必须热灭活的原因，却早已经不再成立：
2、热灭活可以去除支原体污染？
早期Hyclone胎牛血清加工使用的450nm滤膜，早已被100nm滤膜取代；且随着加工技术的创新及严格的监控，血清产品早已没有支原体污染的疑虑。
3、热灭活去除补体等对热敏感的物质?
Hyclone胎牛血清中含有的补体仅为成年牛血清5-50%，而C3 （补体中引起免疫反应的主成分）在胎牛血清中则几乎不能检出，直接使用血清对大多数的细胞株没有负面影响。
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